《亲子鉴定师手记》讲述了以董宁书为代表的青年亲子鉴定师们,面对一个个来进行亲子鉴定的家庭,在一个个充满狗血的案例中破译温情,在小小的亲子鉴定所中上演着无数围绕亲子真相的修罗场,而这群年轻人也在这些案例中找到自己的人生方向,在最残酷的真相中,做出最人性的抉择。。故事发生在20世纪80年代,改革的春风吹遍城市乡村,曾经靠天吃饭的农民们富起来了,他们中间也早早涌现了万元户。家住在梅镇的农民曹冬生(岳跃利 饰)就是一个代表人物,他通过承包茶园过上殷实的生活,然而结发妻子翠娥(刘丹 饰)患有间歇性精神病,致令家中经常阴云密布。为此曹冬生与翠娥离婚,娶了美丽的寡妇金凤(白珊 饰)为妻,只不过还是将翠娥留在家中照顾。但是祥和安宁并未就此来到,翠娥的一双儿女家望和家欣反对父亲再婚,极度抵触金凤及其带来的孩子玉辉和玉莲。而金凤的弟弟以及翠娥的娘家人也成为令她头疼的存在。
接二连三的突发事件让曹家不断滑落,金凤则忍辱负重,担负起照顾一家人的众人……。